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FasL在川崎病患儿血清中的表达及意义

时间:2011-10-25 15:12来源:Admin5 作者:秩名 点击:
[摘要]目的:对Fas/FasL途径的凋亡在川崎病发病中的情况进行研究。方法:采用双抗体夹心Elisa法测定正常健康对照组以及川崎病患儿血清中sFasL浓度。结果:和健康对照组儿童相比较,川崎病患儿急性期血清中sFasL浓度明显降低;经过治疗后,处于亚急性期的川崎

 

  [摘要]目的:对Fas/FasL途径的凋亡在川崎病发病中的情况进行研究。方法:采用双抗体夹心Elisa法测定正常健康对照组以及川崎病患儿血清中sFasL浓度。结果:和健康对照组儿童相比较,川崎病患儿急性期血清中sFasL浓度明显降低;经过治疗后,处于亚急性期的川崎病患儿血清中sFasL浓度较急性期明显升高;而在亚急性期,血清中sFasL浓度较健康对照组儿童相比无明显差异。结论:在川崎病的急性期Fas/FasL途径的凋亡减少,病情稳定后体内细胞凋亡现象趋于正常,提示在川崎病的发病机制中,细胞凋亡参与其中。

  [关键词]细胞凋亡;川崎病

  Expression and significance about FasL in serum of Kawasaki disease patient

  Zhang Xiaoge (Xi’an children's hospital 710002) Lizhe(Shan’xi people’s hospital 710068)

  [abstract] objective: To study the apoptosis about Fas/FasL channel in Kawasaki disease. Methods: To determine the concentration of sFasL in serum of normal group and Kawasaki disease patient with Elisa. Results: Compared with normal group, the concentration of sFasL in acute phase serum of Kawasaki disease patient is depression obviously. The concentration of sFasL in subacute stage serum of Kawasaki disease patient is advanced obviously compared with which in the acute phase. While in subacute stage, the difference is not obvious about the concentration of sFasL compared with normal group. Conclusion: The apoptosis about Fas/FasL channel is decreased at acute phase in Kawasaki disease patient. The apoptosis is tendency to normal when pathogenetic condition stable. We can make a conclusion that apoptosis participates the pathogenesy about Kawasaki disease.

  [key words] apoptosis; Kawasaki disease

  细胞凋亡,又称程序性细胞死亡(programmed cell death.PCD)是遗传基因控制的细胞生理死亡过程。机体细胞增殖和死亡过程达到动态平衡是维持其自身恒定的必要条件。当凋亡过度或不足都将引起细胞总量失衡,导致临床疾病的发生。目前已知的凋亡途径有Fas/FasL,肿瘤坏死因子(TNF)/TNF受体(TNF-R)、死亡受体3(DR3)、DR4、DR5和线粒体途径等。本文就Fas/FasL途径的凋亡在川崎病发病中的情况进行研究。

  1. 样本选择

  1.1 患者选择

  川崎病患儿共20例,诊断均符合川崎病诊断标准[1],无其他并发症。其中男13例,女7例,年龄1岁~7岁(2.96±1.52岁)。所有川崎病患儿均在发热10天之内入院,入院前仅于常规抗感染治疗,未应用激素治疗。入院后予静脉用丙种球蛋白2g/kg冲击治疗;同时给予口服阿司匹林50mg/(kg·d),体温正常后减至30 mg/(kg·d);双嘧达莫3 mg ~5 mg/(kg·d)。

  1.2 对照选择

  健康对照组15例,选择在我院做健康体检的儿童,其中男9例,女6例,年龄1岁~7岁(3.15±1.63岁)。

  2. 方法及步骤

  2.1 实验方法

  双抗体夹心Elisa法测定血清中sFasL浓度。

  2.2 实验试剂

  原装进口美国RnD公司产品sFasL Elisa试剂盒。

  2.3 标本采集及处理

  所有患儿分别于入院时(急性期)以及体温正常1周后(亚急性期)收集标本,健康对照组在门诊采集血清。用干燥管采集血液标本约2mL,标本凝固后在1000转/分速度下离心10分钟,血清分离后在≤-20℃下保存,避免反复冻融。实验前试剂放置室温,实验步骤根据试剂盒说明严格操作。分别检测健康对照组、川崎病患儿急性期以及亚急性期血清中sFasL浓度,并进行比较。

  2.4 统计学处理

  应用SPSS13.0软件进行统计学处理。原始数据用 ±s表示,两样本均数比较采用t检验。

  3.实验结果

  3.1 和健康对照组儿童相比较,川崎病患儿急性期血清中sFasL浓度明显降低,具有统计学意义(p<0.01)。

  3. 2 经过治疗后,处于亚急性期的川崎病患儿血清中sFasL浓度较急性期明显升高,具有统计学意义(p<0.01)。

  3.3 和健康对照组儿童相比较,川崎病患儿亚急性期血清中sFasL浓度无明显变化,不具有统计学意义(p>0.05)。

  4.讨论

  细胞凋亡异常在多种自身免疫性疾病中的作用已经肯定[2-4]。川崎病(KD)是一种免疫介导以全身血管炎为主要病变的急性发热出疹性小儿疾病,部分患儿可发生严重的心血管病变,病因尚未明确。已知该病免疫功能呈全面活化状态,主要表现在急性期外周血单核/巨噬细胞、T细胞数量增多,B细胞多克隆活化,血清细胞因子(IL-1,1L-6,TNF-α.IFN-γ)水平升高等。IL-6是免疫细胞各发展阶段所必需的刺激生长和分化因子,可抑制p53促进细胞凋亡的作用。KD患儿血清IL-6水平异常升高,免疫球蛋白产生增多,细胞因子分泌升高等,是否与IL-6对KD患儿外周血淋巴细胞凋亡的抑制,引起淋巴细胞克隆清除不足有关尚待进一步研究。[5]研究发现KD患者PBLC上Fas和FasL途径的表达明显降低,急性期降低更显著,说明Fas/FasL途径的凋亡减少可能参与了KD的发病,结果上调免疫反应,加重血管炎症。

  本实验研究发现,和健康对照组儿童相比较,川崎病患儿急性期血清中sFasL浓度明显降低;经过治疗后,处于亚急性期的川崎病患儿血清中sFasL浓度较急性期明显升高;而在亚急性期,血清中sFasL浓度较健康对照组儿童相比无明显差异。更近一步证实了在川崎病的急性期Fas/FasL途径的凋亡减少,病情稳定后体内细胞凋亡现象趋于正常,提示在川崎病的发病机制中,细胞凋亡参与其中。

  参考文献:

  1. 诸福棠.实用儿科学.7版.北京:人民卫生出版社,2002:702.

  2. 戴勇,王沙燕,齐晖.等.狼疮肾炎患者血清sFas和sFasL的变化.中华风湿病学杂志,2000,4:89-91.

  3. 石英,黄国良.Fas/Fasl途径在Graves病发病机制中的作用.国外医学内分泌学分册.2005,1:48—50.

  4. 谭清华,赵忠新,张玲珍.多发性硬化患者淋巴细胞Fas和FasL的表达.实用临床医学.2003.3:8-10.

  5. 狄亚珍,邱海燕,张建萍等. 外周血淋巴细胞凋亡调控因子Fas/FasL和血清可溶性Fas与川崎病的相关性研究. 中华风湿病学杂志,2008.12(9),635-637.

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